خرداد 1392
برای رعایت حریم خصوصی نام نگارنده درج نمی شود
تکه هایی از متن به عنوان نمونه :
چکیده
رابطه بین فعالیت آنزیمهای زنجیره تنفسی و بازدهی خوراک در برههای نر قزل متولد شده در نتیجه آمیزش تصادفی
به وسیلهی
رضا مهرابی
در این پژوهش، رابطه بین بازدهی خوراک و فعالیت آنزیمی زنجیره تنفسی در برههای نر قزل متولد شده در نتیجه آمیزش تصادفی بررسی شد. بره‌ها برای 70 روز با خوراکی دارای 70 درصد کنسانتره تجاری، 30 درصد یونجه خشک تغذیه شدند و در خلال دوره، خوراک مصرفی و افزایش وزن روزانه برای برآورد پسمانده خوراک مصرفی (RFI)، نسبت تبدیل خوراک (FCR) و نسبت تبدیل خوراک تصحیح شده (aFCR) اندازهگیری شد. برپایه این برآوردها، بره‌ها به دو گروه RFI، FCR و aFCR بالا و پایین دسته‌بندی شدند. در پایان دوره از ماهیچه دوسر ران پای چپ هر بره یک نمونه 10 گرمی گرفته شد؛ پس از 24 ساعت بره‌ها کشتار شدند و یک نمونه 30 گرمی از ماهیچه دوسر ران پای راست همان بره گرفته شد؛ این نمونه‌ها برای تعیین غلظت پروتین میتوکندریایی و فعالیت زنجیره تنفسی، به کار گرفته شدند. آنالیزهای آماری نشان داد که بره‌ها در دو گروه متفاوت بازدهی خوراک بالا و پایین (RFI، FCR و aFCR) قرار گرفتند (P<0.01). پسمانده خوراک مصرفی با وزن متابولیکی و میانگین افزایش وزن روزانه، همبستگی نداشت، ولی همبستگی متوسطی (56/0= r) با میانگین مصرف خوراک داشت (P<0.01)، همچنان که برههای دارای RFIپایین، روزانه 200 گرم کمتر از برههای دارای RFI بالا، خوراک خوردند. FCR و aFCR همبستگی پایینی (به ترتیب، 39/0 r=و 36/0r=) با میانگین مصرف خوراک و همبستگی متوسطی (به ترتیب، 73/0-r= و 76/0-r=) با میانگین افزایش وزن روزانه داشتند. همبستگی منفی و بالایی بین فعالیت آنزیمی مجموعههای زنجیره تنفسی و RFI در نمونههای به دست آمده پیش (91/0- تا 97/0-) و پس (92/0- تا 97/0-) از کشتار دیده شد. اگرچه فعالیت آنزیمی باFCR و aFCR همبسته نبود. مقایسه فعالیت آنزیمهای زنجیره تنفسی (I-V) در نمونههای گوشت پیش و پس از کشتار نشان داد که فعالیت آنزیمهای زنجیره تنفسی مجموعههای I، III، و V بین دو نمونه از نظر آماری با هم تفاوت معنی‌داری نداشتند، در حالی که فعالیت آنزیمهای زنجیره تنفسی مجموعههای II و IV بین دو نمونه تفاوت معنی‌داری با هم داشتند (P<0.01). این یافتهها پیشنهاد می‌کنند که ممکن است، اندازهگیری فعالیت آنزیمی زنجیره تنفسی مجموعه I، III و V، در ماهیچهای که با روش بیوپسی گرفته شود، روش مناسبی برای گزینش برههای دارای RFI پایین‌تر باشد.
واژگان کلیدی: پسمانده خوراک مصرفی، بره، آنزیمهای میتوکندریایی، بازدهی خوراک
فهرست مطالب
عنوان صفحه
فصل اول………………………………………………………………………………………………………………………………………………………1
مقدمه…………………………………………………………………………………………………………………………………………………….1
1-1- اهمیت پژوهش………………………………………………………………………………………………………………………2
1-2- بهنژادی………………………………………………………………………………………………………………………………….3
1-2-1- آمیزش خویشاوندی…………………………………………………………………………………………………….3
1-2-2- آمیزش ناخویشاوندی………………………………………………………………………………………………….3
1-2-3- آمیزش تصادفی…………………………………………………………………………………………………………..3
1-3- روشهای اندازهگیری بازدهی خوراک…………………………………………………………………………………..4
1-4- نشانگرهای فیزیولوژیکی…………………………………………………………………………………………………………6
1-4-1- نشانگرهای مولکولی…………………………………………………………………………………………………….6
1-4-2- نشانگرهای خونی………………………………………………………………………………………………………..7
1-4-3- نشانگرهای دیگر………………………………………………………………………………………………………….7
1-5- میتوکندری…………………………………………………………………………………………………………………………….7
1-6- میتوکندری و بازدهی خوراك……………………………………………………………………………………………..10
1-7- اهداف پژوهش……………………………………………………………………………………………………………………..11
1-8- فرضیه…………………………………………………………………………………………………………………………………..11
فصل دوم…………………………………………………………………………………………………………………………………………………..12
پیشینه پژوهش…………………………………………………………………………………………………………………………………12
2-1- بازدهی خوراک…………………………………………………………………………………………………………………….13
فصل سوم………………………………………………………………………………………………………………………………………………….27
مواد و روشها…………………………………………………………………………………………………………………………………….27
3-1- محل اجرای پژوهش……………………………………………………………………………………………………………28
3-1-1- پرورش بره………………………………………………………………………………………………………………..28
3-1-2- نمونهبرداری از ماهیچه دوسر ران (پیش از کشتار) ……………………………………………….30
3-1-3- نمونه گیری از ماهیچه دوسر ران (پس از کشتار) ……………………………………………….. 31
3-2- اندازهگیریهای آزمایشگاهی……………………………………………………………………………………………….32
3-2-1- جداسازی میتوکندری………………………………………………………………………………………………32
3-2-2- اندازهگیری غلظت پروتین میتوکندریایی………………………………………………………………..34
3-2-3- اندازهگیری فعالیت مجموعههای آنزیمی زنجیرهی تنفسی…………………………………….35
3-2-3-1- اندازهگیری فعالیت مجموعه آنزیمی I (NADH – یوبیکویینون اکسیدو ردوکتاز)………………………………………………………………………………………………………………………36
3-2-3-2- اندازهگیری فعالیت مجموعه آنزیمی II (سوکسینات دیهیدروژناز)……………38
3-2-3-3- اندازهگیری فعالیت مجموعه آنزیمی III (یوبیکویینول سایتوکروم C ردوکتاز)………………………………………………………………………………………………………………………39
3-2-3-3-1- احیا کردن یوبیکویینون2…………………………………………………………………40
3-2-3-3-2- اندازهگیری فعالیت آنزیم یوبیکویینول سایتوکروم C ردوکتاز…………41
3-2-3-4- اندازهگیری فعالیت مجموعه آنزیمی IV (سایتوکروم C اکسیداز)………………..42
3-2-3-5- اندازهگیری فعالیت مجموعه آنزیمی V (ATP سینتاز)……………………………….43
3-3- تجزیهی آماری…………………………………………………………………………………………………………………….45
فصل چهارم………………………………………………………………………………………………………………………………………………46
یافتهها…………………………………………………………………………………………………………………………………………………46
4-1- بازده مصرف خوراک……………………………………………………………………………………………………………47
4-2- مجموعههای آنزیمی زنجیره تنفسی میتوکندری و بازده خوراک……………………………………..50
4-2-1- فعالیت آنزیمی مجموعه I در نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار……52
4-2-1-1- نمونههای گوشت پیش از کشتار…………………………………………………………………..52
4-2-1-2- نمونههای گوشت پس از کشتار…………………………………………………………………….52
4-2-2- فعالیت آنزیمی مجموعه II در نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار…..54
4-2-2-1- نمونههای گوشت پیش از کشتار…………………………………………………………………..54
4-2-2-2- نمونههای گوشت پس از کشتار…………………………………………………………………….54
4-2-3- فعالیت آنزیمی مجموعه III در نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار…56
4-2-3-1- نمونههای گوشت پیش از کشتار…………………………………………………………………..56
4-2-3-2- نمونههای گوشت پس از کشتار…………………………………………………………………….56
4-2-4- فعالیت آنزیمی مجموعه IV در نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار…58
4-2-4-1- نمونههای گوشت پیش از کشتار…………………………………………………………………..58
4-2-4-2- نمونههای گوشت پس از کشتار…………………………………………………………………….58
4-2-5- فعالیت ATP سینتاز (Cox V)………………………………………………………………………………..60
4-2-5-1- نمونههای گوشت پیش از کشتار…………………………………………………………………..60
4-2-5-2- نمونههای گوشت پس از کشتار…………………………………………………………………….60
4-3- مقایسه فعالیت آنزیمی مجموعههای زنجیره تنفسی در نمونههای گوشت پیش از کشتار (بیوپسی) و پس از کشتار……………………………………………………………………………………………………….62
فصل پنجم………………………………………………………………………………………………………………………………………………..64
بحث……………………………………………………………………………………………………………………………………………………..64
5-1- تفاوت در بازدهی خوراک…………………………………………………………………………………………………….65
5-2- پسمانده خوراک مصرفی و فراسنجه‌های وابسته به آن…………………………………………………….65
5-3- نسبت تبدیل خوراکونسبت تبدیلخوراک تصحیح شدهو فراسنجه‌های وابسته به آن……..66
5-4- نبود تفاوت در پسمانده خوراک مصرفی، بین گروه‌های FCR و AFCR، همچنین نبود تفاوت در FCR (و AFCR) بین گروه‌های RFI، و وجود تفاوت در FCR (یا AFCR) بین گروه‌های FCR (یا AFCR)……………………………………………………………………………………………………..67
5-5- فعالیت آنزیمی مجموعههای زنجیره تنفسی و بازدهی خوراک………………………………………….67
5-6- نبود اثر پدری یکسان در برههای مورد پژوهش و اثر آن بر فعالیت آنزیمی مجموعههای زنجیره تنفسی………………………………………………………………………………………………………………………….69
5-7- فعالیت آنزیمی مجموعههای زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش و پس از کشتار………70
نتیجه‌گیری……………………………………………………………………………………………………………………………………………….70
پیشنهادها…………………………………………………………………………………………………………………………………………………71
منابع…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..72
فهرست جدولها
عنوان صفحه
جدول 2-1- روشهای بازدهی خوراک، فروزه‌های مربوط به بازدهی خوراک…………………………………………14
جدول 3-1 :نیازهای روزانه برههای پرواری با میانگین وزنی 30 كیلوگرم و افزایش وزن 250 گرم در روز……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….30
جدول 3-2 :اجزا و ترکیب جیره (بر حسب ماده خشك) برههای پرواری با میانگین وزنی 30 كیلوگرم و افزایش وزن250 گرم در روز………………………………………………………………………………………………………………………30
جدول 4-1: میانگین وزن آغازین (Initial BW)، وزن پایانی (Final BW)، وزن متابولیکی (MBW)، میانگین افزایش وزن روزانه (ADG)، میانگین مصرف خوراک روزانه (ADFI)، پسمانده خوراک مصرفی (RFI)، نسبت تبدیل خوراک (FCR) و نسبت تبدیل خوراک تصحیح شده (AFCR) در برههای گروهبندی شده، بر پایه پس مانده خوراک مصرفی (RFI)، نسبت تبدیل خوراک (FCR) و نسبت تبدیل خوراک تصحیح شده (AFCR)………………………………………………………………………………………………………………………………. 48
جدول 4-2: فعالیت آنزیمی مجموعههای زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و نمونههای پس از کشتار در برههای گروهبندی شده بر پایه RFI، FCRو AFCR…………………………………………………….51
جدول 4-3- مقایسه فعالیت آنزیمی مجموعه زنجیره تنفسی (I-V) نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار (آزمون T-Test جفتی)…………………………………………………………………………………………………………63
فهرست نگاره‌ها
عنوان صفحه
نگاره 1-1: ساختار شماتیک میتوکندری…………………………………………………………………………………………………….8
نگاره 1-2: ساختار شماتیک زنجیره انتقال الکترون و جایگاه قرارگیری آن بر غشا درونی میتوکندری……9
نگاره 3-1: نمایی از سالن و قفسهای پرورش (الف) و یک قفس انفرادی دارای آخور و آبخوری جداگانه (ب)……………………………………………………………………………………………………………………………………………………………..29
نگاره 3-2: الف- نمونهبرداری از ماهیچه (بیوپسی)، ب- بخیه ساده پس از نمونهبرداری………………………..31
نگاره 3-3: همبستگی مقدار جذب نور در طول موج 595 نانومتر با غلظت پروتین……………………………… 35
نگاره 3-4: ساختار و کنش مجموعهآنزیمی I زنجیره تنفسی…………………………………………………………………. 36
نگاره 3-5: ساختار Complxe II زنجیره تنفسی میتوکندری…………………………………………………………………..37
نگاره 3-6: ساختار و کنش Cox III در زنجیره انتقال الکترون و چرخه Q……………………………………………..40
نگاره 3-7: ساختار و کنش Cox IV………………………………………………………………………………………………………….42
نگاره 3-8: ساختار، زیر مجموعهها و زیر واحدهای ATP سینتاز میتوکندریایی……………………………………..44
نگاره 3-9: مسیرهای واکنشی در اندازهگیری فعالیت Cox V………………………………………………………………….45
نگاره 4-1: همبستگی پسماندهی خوراک مصرفی ((RFI با میانگین وزن متابولیکی بدن ، میانگین افزایش وزن روزانه و میانگین خوراک مصرفی روزانه……………………………………………………………………………….47
نگاره 4-2: همبستگی نسبت تبدیل خوراک با میانگین خوراک مصرفی روزانه و میانگین افزایش وزن روزانه ………………………………………………………………………………………………………………………………………………………….49
نگاره 4-3: همبستگی نسبت تبدیل خوراک تصحیح شده با میانگین وزن متابولیکی بدن میانگین خوراک مصرفی روزانه و میانگین افزایش وزن روزانه……………………………………………………………………………………………..50
نگاره 4-4: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه I زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با RFI…………………………………………………………………………………………………………………………………………….. 52
نگاره 4- 5: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه I زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با FCR…………………………………………………………………………………………………………………………………………53
نگاره 4- 6: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه I زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با AFCR. …………………………………………………………………………………………………………………………………….53
نگاره 4-7: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه II زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با RFI. ………………………………………………………………………………………………………………………………………. 54
نگاره 4- 8: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه II زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با FCR. …………………………………………………………………………………………………………………………………….. 55
نگاره 4- 9: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه II زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با AFCR. …………………………………………………………………………………………………………………………………….55
نگاره 4-10: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه III زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با RFI. …………………………………………………………………………………………………………………………………56
نگاره 4- 11: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه III زنجیره نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با FCR. …………………………………………………………………………………………………………………………………………..57
نگارهی 4- 12: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه III زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با AFCR……………………………………………………………………………………………………………………………….57
نگاره 4-13: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه IV زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با RFI…………………………………………………………………………………………………………………………………..59
نگاره 4- 14: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه IV زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با FCR…………………………………………………………………………………………………………………………………59
نگاره 4- 15: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه IV زنجیره نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با AFCR…………………………………………………………………………………………………………………………………………..60
نگاره 4-16: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه V زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با RFI…………………………………………………………………………………………………………………………………………..61
نگاره 4- 17: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه Vزنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با FCR………………………………………………………………………………………………………………………………….61
نگاره 4- 18: همبستگی فعالیت آنزیمی مجموعه V زنجیره تنفسی نمونههای گوشت پیش از کشتار و پس از کشتار با AFCR……………………………………………………………………………………………………………………………… 62
فهرست کوتاه واژگان
نام به فارسی
نام به انگلیسی
کوتاه واژگان
میانگین افزایش وزن روزانه
Average Daily Gain
ADG
نسبت تبدیل خوراک تصحیح شده
Adjust Feed Conversion Ratio
AFCR
آدنوزین ترای‌فسفات
Adenosine Triphosphate
ATP
آلبومین سرم گاوی
Bovine Serum Albumin
BSA
افزایش وزن بدن
Body Weight Gain
BWG
درصد کلسیم
Calcium %
Ca%
درصد پروتین خام
Crude Protein %
CP%
2و6 دای کلروفنول ایندوفنول
Dichlorophenol Indophenol
DCPIP
خوراک مصرفی روزانه
Daily Feed Intake
DFI
ماده خشک مصرفی
Dry Matter Intake
DMI
دیوکسی ریبونوکلییک اسید
Deoxyribonucleic Acid
DNA
زنجیره انتقال الکترون
Electron Transport Chain
ETC
فلاوین‌آدنین دی‌نوکلیوتاید
Flavin Adenine Dinucleotide
FADH2
نسبت تبدیل خوراک
Feed Conversion Ratio
FCR
بازدهی خوراک
Feed Efficiency
FE
خوراک مصرفی
Feed Intake
FI
نام به فارسی
نام به انگلیسی
کوتاه واژگان
نسبت رشد به خوراک مصرفی
Gain: Feed
G:F
هورمون رشد انسولین مانند 1
Insulin-Like Growth Factor 1
IGF-1
نسبت کلیبر
Kleiber Ratio
KR
وزن زنده
Liveweight
LWT
وزن متابولیکی بدن
Metabolic Body Weight
MBW
میانگین جرم هموگلوبین
انرژی متابولیزمی
Mean Corpuscular Hemoglobin
MCH
Metabolizable Energy
ME
دیوکسیریبو نوکلیکاسید میتوکندریایی
Mitochondrial Deoxyribonucleic Acid
MtDNA
وزن متابولیکی
Metabolic Weight
MW
نیكوتین آمید آدنین دی نوكلیوتاید
Nicotinamide Adenine Dinucleotide
NADH
درصد فسفر
Phosphorus %
P %
بازده جزیی رشد
Partial Efficiency Of Growth
PEG
فنازین متوسولفات
Phenazine Methosulfate
PMS
نرخ کنترل تنفس
Respiratory Control Ratio
RCR
پسمانده خوراک مصرفی
Residual Feed Intake
RFI
نسبت رشد وابسته
Relative Growth Rate
RGR
گونههای اکسیژن واکنش دهنده
Reactive Oxygen Species
ROS
چرخه کربس
Tricarboxylic Acid
TCA